Punti chiave
- ✓Identità (spettrometria di massa) e purezza (HPLC) sono le due verifiche più importanti.
- ✓Un CoA ha senso solo se il suo numero di lotto corrisponde alla fiala che avete in mano.
- ✓Cercate dati grezzi (un cromatogramma e uno spettro di massa), non solo una tabella di numeri.
I campi fondamentali
La maggior parte dei CoA segue lo stesso schema. Leggerli in ordine è il modo più rapido per individuare le lacune.
- Nome del prodotto e sequenza: il composto deve essere indicato con precisione, idealmente con sequenza o numero CAS.
- Numero di lotto: il collegamento tra il documento e la fiala fisica.
- Aspetto: di solito una polvere liofilizzata bianca. Da solo è un controllo debole.
- Purezza tramite HPLC: la percentuale del picco principale. Vedi la guida su purezza e contenuto netto di peptide.
- Identità tramite spettrometria di massa: la massa molecolare osservata confrontata con quella teorica.
- Data e firma: quando sono stati eseguiti i test e da chi.
Verificare l'identità con la massa
La spettrometria di massa dice se la molecola è quella ordinata. Calcolate la massa attesa dalla sequenza, poi confrontatela con il valore osservato sul CoA. Una differenza superiore a circa lo 0,1% merita una spiegazione.
Fate attenzione a quale massa viene citata. La massa monoisotopica corrisponde al picco principale negli strumenti ad alta risoluzione, mentre la massa media pesa ogni isotopo. Il nostro calcolatore di massa dei peptidi mostra entrambe.
Leggere il tracciato HPLC
Un valore di purezza è l'area del picco principale divisa per l'area totale di tutti i picchi. Non dice nulla su acqua, sali o controioni, che non compaiono allo stesso modo.
Se è incluso un cromatogramma, cercate un unico picco dominante, una linea di base piatta e una lunghezza d'onda di rilevazione dichiarata. Di una tabella di purezza senza tracciato è molto più difficile fidarsi.
Segnali d'allarme
Nessuno di questi dimostra che un documento sia falso, ma ciascuno è un motivo per fare domande al fornitore.
- Nessun numero di lotto, o uno che non corrisponde alla fiala.
- Purezze a cifra tonda, come esattamente 99,0%, senza cromatogramma.
- Una massa indicata come valore teorico anziché osservato.
- Modelli generici che potrebbero appartenere a qualsiasi peptide.
- Nessun analista, laboratorio o metodo indicato.
Test indipendenti
Il CoA del fornitore è un punto di partenza. Per lavori in cui l'identità è critica, l'analisi di terzi su un campione conservato è la forma di prova più solida.
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