Punti chiave
- ✓Quasi tutti i peptidi di ricerca sono prodotti mediante sintesi peptidica in fase solida (SPPS).
- ✓Purificazione e liofilizzazione lasciano controioni e acqua nella polvere finale.
- ✓Il controllo qualità combina separazione (HPLC) e identificazione (spettrometria di massa).
Costruire la catena
Nella sintesi in fase solida il primo amminoacido è ancorato a una resina e gli altri residui vengono aggiunti uno alla volta, ciascuno protetto in modo che reagisca solo il gruppo desiderato. Dopo ogni accoppiamento i gruppi protettivi vengono rimossi e si aggiunge il residuo successivo.
Gli errori si accumulano con la lunghezza: una piccola percentuale di accoppiamenti falliti a ogni passaggio significa che i peptidi più lunghi portano più impurezze troncate e con delezioni.
Distacco e purificazione
La catena completata viene staccata dalla resina con un acido forte, comunemente acido trifluoroacetico (TFA), che rimuove anche i gruppi protettivi delle catene laterali. Il prodotto grezzo viene poi purificato mediante HPLC preparativa, che separa il bersaglio dalle sue impurezze.
Il TFA usato in questo processo è il motivo per cui molti peptidi sono forniti come sali di trifluoroacetato, e in parte il motivo per cui il peso della fiala supera quello del peptide.
Liofilizzazione
Le frazioni purificate vengono riunite e liofilizzate. La liofilizzazione rimuove l'acqua a bassa temperatura e dà una polvere stabile, ma lascia una certa umidità residua e un comportamento igroscopico.
Controllo qualità
Non ogni lotto è testato per tutto. Un CoA dovrebbe indicare quali test sono stati effettivamente eseguiti.
- HPLC analitica per la purezza.
- Spettrometria di massa per l'identità.
- Analisi degli amminoacidi o contenuto di azoto per il contenuto netto di peptide.
- Titolazione Karl Fischer per il contenuto d'acqua.
- Test di endotossine e sterilità per applicazioni su cellule o sensibili.
Dove acquistare
Perché indirizziamo i ricercatori a Nordapep
Confrontare i composti è solo metà del lavoro. L’altra metà è sapere che il flacone contiene ciò che dice l’etichetta. Nordapep pubblica la documentazione di lotto per ogni composto che vende.
Sfoglia il catalogo Nordapep →Il numero di lotto sull’etichetta corrisponde al certificato, così puoi verificare il contenuto del flacone.
Inserisci il numero di lotto del tuo flacone nello strumento di verifica di Nordapep.
La purezza è misurata con RP-HPLC, il metodo standard per peptidi di queste dimensioni.
Kit per i confronti più comuni e prezzi a scaglioni per i volumi.