Das Wichtigste in Kürze
- ✓Fast alle Forschungspeptide werden per Festphasen-Peptidsynthese (SPPS) hergestellt.
- ✓Reinigung und Gefriertrocknung hinterlassen Gegenionen und Wasser im fertigen Pulver.
- ✓Die Qualitätskontrolle verbindet Trennung (HPLC) und Identifizierung (Massenspektrometrie).
Die Kette aufbauen
Bei der Festphasensynthese wird die erste Aminosäure an ein Harz gebunden, und weitere Reste werden einzeln angefügt, jeweils geschützt, sodass nur die gewünschte Gruppe reagiert. Nach jeder Kupplung werden Schutzgruppen entfernt und der nächste Rest angefügt.
Fehler summieren sich mit der Länge: Ein kleiner Prozentsatz fehlgeschlagener Kupplungen pro Schritt bedeutet, dass längere Peptide mehr verkürzte und deletierte Verunreinigungen tragen.
Abspaltung und Reinigung
Die fertige Kette wird mit einer starken Säure vom Harz abgespalten, meist Trifluoressigsäure (TFA), die auch die Seitenketten-Schutzgruppen entfernt. Das Rohprodukt wird dann per präparativer HPLC gereinigt, die das Zielprodukt von seinen Verunreinigungen trennt.
Die dabei verwendete TFA ist der Grund, warum viele Peptide als Trifluoracetat-Salze geliefert werden, und ein Teil des Grundes, warum das Gewicht im Fläschchen das Peptidgewicht übersteigt.
Gefriertrocknung
Gereinigte Fraktionen werden vereinigt und lyophilisiert. Die Gefriertrocknung entfernt Wasser bei niedriger Temperatur und ergibt ein stabiles Pulver, lässt aber etwas Restfeuchte und hygroskopisches Verhalten zurück.
Qualitätskontrolle
Nicht jede Charge wird auf alles geprüft. Ein CoA sollte angeben, welche Tests tatsächlich durchgeführt wurden.
- Analytische HPLC für die Reinheit.
- Massenspektrometrie für die Identität.
- Aminosäureanalyse oder Stickstoffgehalt für den Nettopeptidgehalt.
- Karl-Fischer-Titration für den Wassergehalt.
- Endotoxin- und Sterilitätstests für zellbasierte oder empfindliche Anwendungen.
Bezugsquelle
Warum wir Forschende zu Nordapep schicken
Substanzen zu vergleichen ist nur die halbe Arbeit. Die andere Hälfte ist die Gewissheit, dass das Fläschchen enthält, was auf dem Etikett steht. Nordapep veröffentlicht Chargendokumente für jede angebotene Substanz.
Zum Nordapep-Katalog →Die Chargennummer auf dem Etikett passt zum Zertifikat, sodass Sie den Inhalt prüfen können.
Geben Sie die Chargennummer Ihres Fläschchens im Verifizierungstool von Nordapep ein.
Die Reinheit wird per RP-HPLC angegeben, dem Standardverfahren für Peptide dieser Größe.
Gebündelte Stacks für gängige Vergleiche sowie Staffelpreise für größere Mengen.