Najważniejsze wnioski
- ✓Czystość HPLC porównuje peptyd docelowy z innymi substancjami pokrewnymi peptydom.
- ✓Zawartość netto peptydu uwzględnia wodę i przeciwjony i zwykle jest niższa niż czystość.
- ✓W pracach wrażliwych na stężenie koryguj o zawartość netto, zamiast zakładać, że fiolka to sam peptyd.
Co mierzy czystość HPLC
Wysokosprawna chromatografia cieczowa rozdziela składniki próbki. Wartość czystości to udział sygnału pochodzącego od peptydu docelowego w porównaniu z zanieczyszczeniami peptydowymi skróconymi, z delecjami lub inaczej zmodyfikowanymi.
Jest ślepa na wszystko, co nie absorbuje przy długości fali detekcji, w tym na wodę i większość soli.
Co naprawdę jest w fiolce
Liofilizowany peptyd rzadko stanowi 100% masy. Resztę zwykle tworzą:
- Przeciwjony, najczęściej trifluorooctan (z oczyszczania) lub octan, które równoważą ładunek reszt zasadowych.
- Woda resztkowa, ponieważ liofilizowane peptydy są higroskopijne.
- Niewielkie ilości resztkowych rozpuszczalników lub substancji pomocniczych.
Zawartość netto peptydu
Zawartość netto peptydu to ułamek masowy, który rzeczywiście jest peptydem. Oznacza się ją metodami takimi jak analiza aminokwasów lub zawartość azotu i często jest wyraźnie niższa niż czystość HPLC. Peptydy z wieloma resztami zasadowymi niosą więcej przeciwjonów, więc ich zawartość netto bywa niższa.
Dlaczego ma to znaczenie dla stężeń
Jeśli rozpuścisz to, co uważasz za 5 mg peptydu, a tylko 80% proszku jest peptydem, rzeczywista ilość to 4 mg i każde obliczone stężenie jest błędne o 20%. W pracy jakościowej może to nie mieć znaczenia; w porównaniach ilościowych ma.
Kalkulator roztworu podstawowego na tej stronie zawiera pole zawartości peptydu, aby można było wprowadzić korektę, gdy wartość jest znana.
Gdzie kupić
Dlaczego kierujemy badaczy do Nordapep
Porównanie związków to tylko połowa pracy. Druga połowa to pewność, że fiolka zawiera to, co mówi etykieta. Nordapep publikuje dokumentację partii dla każdego sprzedawanego związku.
Zobacz katalog Nordapep →Numer partii na etykiecie odpowiada jej świadectwu, aby można było sprawdzić zawartość fiolki.
Wpisz numer partii z fiolki w narzędziu weryfikacyjnym Nordapep.
Czystość mierzona jest metodą RP-HPLC, standardem dla peptydów tej wielkości.
Zestawy do typowych porównań i ceny progowe przy większych ilościach.