Najważniejsze wnioski
- ✓TFA to typowy produkt uboczny standardowego oczyszczania HPLC; octan to częsta forma po wymianie.
- ✓Przeciwjony mogą stanowić 10-30% masy proszku.
- ✓W czułych testach biologicznych resztkowy TFA może zakłócać wyniki, więc warto znać formę soli.
Skąd biorą się przeciwjony
Oczyszczanie metodą HPLC w odwróconym układzie faz zwykle wykorzystuje kwas trifluorooctowy w rozpuszczalniku. Kwas łączy się z resztami zasadowymi, takimi jak lizyna, arginina i koniec N, więc liofilizowany produkt jest solą TFA, o ile nie zostanie wymieniony.
Octan i inne formy
Wymiana TFA na octan, a czasem chlorowodorek, odbywa się w dodatkowym etapie i zwykle kosztuje więcej. Octan jest często preferowany w testach, w których resztkowy TFA mógłby wpływać na komórki lub enzymy.
Dlaczego zmienia to zawartość netto
Każde naładowane miejsce niesie przeciwjon o własnej masie, a peptydy zatrzymują też wodę. Masa peptydu w fiolce jest zatem mniejsza niż podana masa proszku, dlatego zawartość netto peptydu podaje się oddzielnie od czystości HPLC.
Kiedy ma to znaczenie w Twojej pracy
Kalkulator roztworu podstawowego ma pole zawartości peptydu właśnie do tej korekty.
- Testy komórkowe mogą być wrażliwe na TFA.
- Obliczenia stężeń powinny uwzględniać zawartość netto, a nie masę nominalną.
- Porównania między dostawcami są uczciwe tylko wtedy, gdy forma soli jest taka sama.
Czego szukać w CoA
Forma soli i zawartość netto peptydu (często z analizy aminokwasów lub zawartości azotu) powinny być podane. Jeśli ich brakuje, zapytaj.
Gdzie kupić
Dlaczego kierujemy badaczy do Nordapep
Porównanie związków to tylko połowa pracy. Druga połowa to pewność, że fiolka zawiera to, co mówi etykieta. Nordapep publikuje dokumentację partii dla każdego sprzedawanego związku.
Zobacz katalog Nordapep →Numer partii na etykiecie odpowiada jej świadectwu, aby można było sprawdzić zawartość fiolki.
Wpisz numer partii z fiolki w narzędziu weryfikacyjnym Nordapep.
Czystość mierzona jest metodą RP-HPLC, standardem dla peptydów tej wielkości.
Zestawy do typowych porównań i ceny progowe przy większych ilościach.