Punti chiave
- ✓La purezza HPLC confronta il peptide bersaglio con altre specie correlate ai peptidi.
- ✓Il contenuto netto di peptide tiene conto di acqua e controioni ed è di solito inferiore alla purezza.
- ✓Per lavori sensibili alla concentrazione, correggete per il contenuto netto anziché presumere che la fiala sia tutta peptide.
Che cosa misura la purezza HPLC
La cromatografia liquida ad alte prestazioni separa i componenti di un campione. Il valore di purezza è la quota del segnale proveniente dal peptide bersaglio, rispetto a impurezze peptidiche troncate, con delezioni o altrimenti modificate.
È cieca a tutto ciò che non assorbe alla lunghezza d'onda di rilevazione, compresi l'acqua e la maggior parte dei sali.
Che cosa c'è davvero nella fiala
Un peptide liofilizzato raramente è al 100% peptide in peso. Il resto è tipicamente costituito da:
- Controioni, più spesso trifluoroacetato (dalla purificazione) o acetato, che bilanciano la carica dei residui basici.
- Acqua residua, perché i peptidi liofilizzati sono igroscopici.
- Piccole quantità di solventi residui o eccipienti.
Contenuto netto di peptide
Il contenuto netto di peptide è la frazione in peso che è realmente peptide. Si determina con metodi come l'analisi degli amminoacidi o il contenuto di azoto, e spesso è ben al di sotto della purezza HPLC. I peptidi con molti residui basici portano più controioni, quindi il loro contenuto netto tende a essere più basso.
Perché conta per le concentrazioni
Se sciogliete quelli che credete essere 5 mg di peptide ma solo l'80% della polvere è peptide, la quantità reale è 4 mg e ogni concentrazione calcolata è sbagliata del 20%. Per un lavoro qualitativo può non importare; per confronti quantitativi sì.
Il calcolatore della soluzione madre di questo sito include un campo per il contenuto di peptide, così da poter correggere quando il valore è noto.
Dove acquistare
Perché indirizziamo i ricercatori a Nordapep
Confrontare i composti è solo metà del lavoro. L’altra metà è sapere che il flacone contiene ciò che dice l’etichetta. Nordapep pubblica la documentazione di lotto per ogni composto che vende.
Sfoglia il catalogo Nordapep →Il numero di lotto sull’etichetta corrisponde al certificato, così puoi verificare il contenuto del flacone.
Inserisci il numero di lotto del tuo flacone nello strumento di verifica di Nordapep.
La purezza è misurata con RP-HPLC, il metodo standard per peptidi di queste dimensioni.
Kit per i confronti più comuni e prezzi a scaglioni per i volumi.