Belangrijkste punten
- ✓HPLC-zuiverheid vergelijkt het doelpeptide met andere peptideverwante stoffen.
- ✓Het netto peptidegehalte houdt rekening met water en tegenionen en ligt meestal lager dan de zuiverheid.
- ✓Corrigeer bij concentratiegevoelig werk voor het nettogehalte in plaats van aan te nemen dat de flacon geheel uit peptide bestaat.
Wat HPLC-zuiverheid meet
Hogedrukvloeistofchromatografie scheidt de componenten van een monster. Het zuiverheidscijfer is het aandeel van het signaal dat van het doelpeptide komt, vergeleken met ingekorte, gedeleteerde of anderszins gewijzigde peptideverontreinigingen.
Ze is blind voor alles wat bij de detectiegolflengte niet absorbeert, waaronder water en de meeste zouten.
Wat er werkelijk in de flacon zit
Een gevriesdroogd peptide bestaat zelden voor 100% van het gewicht uit peptide. De rest bestaat doorgaans uit:
- Tegenionen, meestal trifluoroacetaat (uit de zuivering) of acetaat, die de lading op basische residuen compenseren.
- Restwater, omdat gevriesdroogde peptiden hygroscopisch zijn.
- Kleine hoeveelheden restoplosmiddelen of hulpstoffen.
Netto peptidegehalte
Het netto peptidegehalte is de gewichtsfractie die werkelijk peptide is. Het wordt bepaald met methoden zoals aminozuuranalyse of stikstofgehalte en ligt vaak ruim onder de HPLC-zuiverheid. Peptiden met veel basische residuen dragen meer tegenionen, dus hun nettogehalte is doorgaans lager.
Waarom het uitmaakt voor concentraties
Als u oplost wat u voor 5 mg peptide houdt, maar slechts 80% van het poeder peptide is, is de werkelijke hoeveelheid 4 mg en zit elke berekende concentratie er 20% naast. Voor kwalitatief werk maakt dat misschien niet uit; voor kwantitatieve vergelijkingen wel.
De stockoplossingcalculator op deze site heeft een veld voor het peptidegehalte, zodat u kunt corrigeren wanneer het cijfer bekend is.
Waar kopen
Waarom we onderzoekers naar Nordapep sturen
Stoffen vergelijken is maar de helft van het werk. De andere helft is zeker weten dat het flesje bevat wat op het etiket staat. Nordapep publiceert batchdocumentatie voor elke stof die het verkoopt.
Bekijk de Nordapep-catalogus →Het batchnummer op het etiket hoort bij het certificaat, zodat je de inhoud kunt controleren.
Voer het batchnummer van je flesje in bij de verificatietool van Nordapep.
Zuiverheid wordt gemeten met RP-HPLC, de standaardmethode voor peptiden van deze grootte.
Sets voor veelvoorkomende vergelijkingen en staffelprijzen voor grotere volumes.