Puntos clave
- ✓El TFA es el subproducto habitual de la purificación estándar por HPLC; el acetato es una forma intercambiada frecuente.
- ✓Los contraiones pueden suponer el 10-30 % de la masa del polvo.
- ✓En ensayos biológicos sensibles, el TFA residual puede interferir, así que conviene conocer la forma de sal.
De dónde vienen los contraiones
La purificación por HPLC en fase reversa suele usar ácido trifluoroacético en el disolvente. El ácido se empareja con residuos básicos como la lisina, la arginina y el extremo N-terminal, de modo que el producto liofilizado es una sal de TFA salvo que se intercambie.
Acetato y otras formas
El intercambio de TFA por acetato, o a veces clorhidrato, se hace en un paso adicional y suele costar más. El acetato se prefiere a menudo en ensayos donde el TFA residual podría afectar a células o enzimas.
Por qué cambia el contenido neto
Cada sitio cargado lleva un contraión con su propia masa, y los péptidos también retienen agua. La masa de péptido por vial es, por tanto, menor que la masa de polvo indicada, y por eso el contenido neto de péptido se informa aparte de la pureza por HPLC.
Cuándo importa para su trabajo
La calculadora de solución madre tiene un campo de contenido de péptido precisamente para este ajuste.
- Los ensayos con células pueden ser sensibles al TFA.
- Los cálculos de concentración deben usar el contenido neto, no la masa nominal.
- Las comparaciones entre proveedores solo son justas si la forma de sal es la misma.
Qué buscar en un CoA
Deben indicarse la forma de sal y el contenido neto de péptido (a menudo por análisis de aminoácidos o contenido de nitrógeno). Si faltan, pregunte.
Dónde comprar
Por qué enviamos a los investigadores a Nordapep
Comparar compuestos es solo la mitad del trabajo. La otra mitad es saber que el vial contiene lo que dice la etiqueta. Nordapep publica la documentación de lote de cada compuesto que vende.
Ver el catálogo de Nordapep →El número de lote de la etiqueta coincide con su certificado, para comprobar el contenido del vial.
Introduce el número de lote de tu vial en la herramienta de verificación de Nordapep.
La pureza se mide por RP-HPLC, el método de referencia para péptidos de este tamaño.
Packs para comparaciones habituales y precios escalonados por volumen.