Puntos clave
- ✓La carga neta al pH de trabajo es el primer indicador de solubilidad.
- ✓Los tramos hidrófobos reducen la solubilidad en agua.
- ✓Pruebe siempre primero con una porción pequeña y siga las indicaciones del proveedor para el producto concreto.
Contar la carga
Asigne +1 a cada lisina, arginina y al extremo N-terminal libre, y -1 a cada aspartato, glutamato y al extremo C-terminal libre. Un péptido claramente positivo tiende a disolverse en soluciones ligeramente ácidas, y uno claramente negativo en soluciones ligeramente básicas. La calculadora de masa de péptidos indica la carga y el punto isoeléctrico a partir de una secuencia.
Fijarse en el contenido hidrófobo
Los péptidos en los que más de aproximadamente la mitad de los residuos son hidrófobos (leucina, valina, isoleucina, fenilalanina, triptófano) suelen resistirse a los disolventes acuosos y pueden necesitar un codisolvente orgánico.
El punto isoeléctrico
Los péptidos son menos solubles cerca de su punto isoeléctrico, donde la carga neta es cero. Alejar el pH de él suele ayudar.
Precauciones prácticas
La documentación del proveedor tiene prioridad sobre las reglas generales para un producto determinado.
- Pruebe una cantidad pequeña antes de comprometer todo el vial.
- Los residuos propensos a la oxidación (Cys, Met, Trp) pueden limitar la elección de disolvente.
- La agregación puede parecer turbidez; filtre o deseche en lugar de suponer que se aclarará.
Dónde comprar
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Comparar compuestos es solo la mitad del trabajo. La otra mitad es saber que el vial contiene lo que dice la etiqueta. Nordapep publica la documentación de lote de cada compuesto que vende.
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La pureza se mide por RP-HPLC, el método de referencia para péptidos de este tamaño.
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